|
تفاصيل المنتج:
|
| اسم المنتج: | ligase DNA | 10299ES40: | 40000 يو |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400000 يو | 10299 إي إس 83: | 1،600،000 يو |
| إدخال الخلد DNA (pmol): | إدخال DNA (ng) / [0.66 × متوسط طول إدخال DNA (bp)] | طلب: | للاستخدام البحثي فقط! |
| تسليط الضوء: | 400 U / UL T4 DNA Ligase,بحث T4 DNA Ligase,T4 DNA Ligase كاشف كيميائي حيوي |
||
Ligase DNA T4 السريع (400 وحدة / ميكرولتر)
Fast T4 DNA Ligase هو منتج إنزيم واحد يمكن استخدامه لتوصيل أجزاء الحمض النووي والمحول في عملية بناء مكتبة NGS.تم التحقق من المنتج من خلال تسلسل عالي الإنتاجية وله جودة ممتازة.يتمتع هذا الإنزيم بقدرة ربط عالية الكفاءة ، وهو مناسب جدًا لربط أجزاء الحمض النووي المعقدة ، مثل المحول Ω لمنصة MGI.يوصى بتحديد Hieff NGSTM Ultima DNA Ligation Module (Cat # 12604) المكون الأساسي لها هو Fast T4 DNA Ligase للعملاء الذين لا يحتاجون إلى تعديل النظام.
| اسم المنتج | قطة# | بحجم |
| Fast T4 DNA Ligase (400 وحدة / ميكرولتر) | 10299ES40 | 40000 يو |
| 10299ES42 | 400000 يو | |
| 10299 إي إس 83 |
1،600،000 يو |
وصف المنتج حولLigase DNA T4 السريع
Fast T4 DNA Ligase هو منتج إنزيم واحد يمكن استخدامه لتوصيل أجزاء الحمض النووي والمحول في عملية بناء مكتبة NGS.تم التحقق من المنتج من خلال تسلسل عالي الإنتاجية وله جودة ممتازة.يتمتع هذا الإنزيم بقدرة ربط عالية الكفاءة ، وهو مناسب جدًا لربط أجزاء الحمض النووي المعقدة ، مثل المحول Ω لمنصة MGI.يوصى بتحديد Hieff NGSTMوحدة Ultima DNA Ligation (Cat # 12604) المكون الأساسي لها هو Fast T4 DNA Ligase للعملاء الذين لا يحتاجون إلى تعديل النظام.
مكون المنتجق منLigase DNA T4 السريع
| رقم المكون | عناصر | قطة#/بحجم | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299 إي إس 83 | ||
| 10299-أ | Fast T4 DNA Ligase (400 وحدة / ميكرولتر) | 100 ميكرولتر | 1 مل | 4 مل |
| 10299-ب | 10 × T4 DNA Ligase Buffer | 250 ميكرولتر | 5 × 500 ميكرولتر | 10 مل |
تعليمات
1. لا يتم تنقية مجموعات بناء مكتبة DNA السائدة الحالية بشكل عام بعد الإصلاح النهائي ومعالجة A-Tailing ، وتقوم مباشرة بربط المحول.يرجى الرجوع إلى التحضير التالي لنظام التفاعل.دوامة جيدا ، تدور لفترة وجيزة واحتضان لمدة 15 دقيقة عند 20 درجة مئوية.
| عناصر | الحجم (ميكرولتر) |
| DNA الذيل dA | 60 |
| 10 × T4 DNA Ligase Buffer | 10 |
| 50٪ ربط 6000 | 10* |
| محول DNA | X** |
| Fast T4 DNA Ligase (400 وحدة / ميكرولتر) | 1-5*** |
| ddH2ا | ما يصل الى 100 |
[ملحوظة]:* 50٪ PEG 6000 غير متوفر في الطقم ، فأنت بحاجة إلى تحضيره بنفسك.
** راجع الجدول التالي لمعرفة كمية المحول.
*** مقدارسريعيمكن إضافة T4 DNA Ligase المستخدم 1-5 ميكرولتر حسب الحاجة.
2. تؤثر جودة وتركيز المحولات المستخدمة بشكل مباشر على كفاءة الربط وعائد المكتبة.قد ينتج عن الاستخدام المفرط للمحول مزيدًا من ثنائيات المحول ، بينما قد يؤثر الاستخدام الأقل على كفاءة الربط وإنتاجية المكتبة.يسرد الجدول التالي الكمية الموصى بها من المحول المستخدم في مواقف إدخال DNA مختلفة باستخدام هذه المجموعة.
| إدخال الحمض النووي |
المحول: إدخال DNA (نسبة المولي) |
إدخال الحمض النووي |
المحول: إدخال DNA (نسبة المولي) |
| 1 ميكروجرام | 10: 1 | 50 نانوغرام | 100: 1 |
| 500 نانوغرام | 20: 1 | 25 نانوغرام | 200: 1 |
| 250 نانوغرام | 40: 1 | 1 نانوغرام | 200: 1 |
| 100 نانوغرام | 100: 1 | 500 ص | 400: 1 |
[ملاحظة]: إدخال DNA الخلد (pmol) ≈ إدخال DNA (ng) / [0.66 × إدخال DNA متوسط الطول (بي بي)].
الخطوة 1: احسب عدد مولات إدخال DNA.الصيغة: إدخال DNA الخلد (pmol) ≈ إدخال DNA (ng) / [0.66 × إدخال DNA متوسط الطول (بي بي)] ؛إدخال الخلد DNA (pmol) = 100 (0.66 × 300) = 0.5 pmol ؛
الخطوة 2: وفقًا للجدول أعلاه ، احسب عدد مولات المحول المضافة .؛عندما يكون DNA المدخل 100 نانوغرام ، فإن النسبة المولية للمحولات: DNA الإدخال 100: 1 ، وعدد مولات المحولات المضافة = 100 × 0.5 pmol = 50 pmol ؛
الخطوه 3: احسب حجم إضافة المحول.تركيز المحول = 15 ميكرولتر / لتر (إذا كنت تستخدم محول شركة أخرى ، فأنت بحاجة إلى تحديد تركيزه وفقًا لتعليماته) ؛تمت إضافة حجم المحول = مولات المحول المضافة (50 ميكرولتر) ÷ تركيز المحول (15 ميكرولتر / لتر) = 3.34 ميكرولتر (ملاحظة: 15 ميكرولتر / لتر = 15 ميكرولتر / ميكرولتر) ؛
في تلخيص، الحجم الذي يمكن إضافة المحول إليه هو 3.4 ميكرولتر.(ملاحظة: الحد الأقصى لحجم إضافة المحول لا يتجاوز 5 ميكرولتر).
يتم شحن المنتج مع عبوات ثلج ويمكن تخزينه في درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة عامين.
تعريف الوحدة
في نظام تفاعل ربط 20 ميكرولتر ، عندما يتفاعل 6 ميكروغرام من DNA-Hind عند 16 ℃ لمدة 30 دقيقة ، تم تحديد كمية الإنزيم المطلوبة لإعطاء أكثر من 50 ٪ من ربط شظايا الحمض النووي كوحدة واحدة (U).
يحذر
1. T4 DNA Ligase حساس لتمسخ الطبيعة الفيزيائية.عند الخلط ، اقلب الأنبوب برفق ورج جيدًا.لا تهز بقوة.
2. يجب تخزين الإنزيمات في صندوق ثلج أو في حمام جليدي عند استخدامها ، ويجب تخزينها في درجة حرارة -20 درجة مئوية فور الاستخدام ؛
3.هذا المنتج للاستخدام البحثي فقط!
4.من أجل سلامتك وصحتك ، يرجى ارتداء معاطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة للتشغيل.
إذا كنت بحاجة إلى مزيد من المعلومات حول Fast T4 DNA ligase (400 وحدة / ميكرولتر) ، فيرجى الاتصال بنا ، شكرًا لك
اتصل شخص: Ms Kris
الهاتف :: +8613049739311
